A ordem Anura (sapos, rãs e pererecas) é um dos maiores grupos de vertebrados encontrados no bioma Mata Atlântica, caracterizada por um alto grau de endemismos. A família Odontophrynidae abriga três gêneros: Macrogenioglottus com apenas uma espécie, Odontophrynus (11 espécies) e o gênero Proceratophrys (40 espécies). Neste último a espécie P. boiei é a que apresenta a mais ampla distribuição, ocorrendo na Argentina, Paraguai e Brasil. Para a maioria das espécies não há informações sobre o cariótipo, marcador este que pode melhor descrever as espécies, ajudar em incertezas taxonômicas e compreender melhor cenários evolutivos. No estado do Paraná não há descrições cromossômicas da família Odontophrynidae. O presente trabalho realizou um estudo com marcadores cromossômicos em P. boiei, como o padrão de distribuição de heterocromatinas constitutivas e o mapeamento de genes ribossômicos 45S (Regiões Organizadoras de Nucléolo). O gênero Proceratophrys possui mudanças cariotípicas discretas com uma estrutura cariotípica estável para todo o Brasil, composta de 22 cromossomos metacêntricos e submetacêntricos. O bandamento C revelou heterocromatinas restritas às regiões centroméricas em todos os cromossomos e colocalizadas com genes 45S, os quais estão localizados na região terminal do braço curto do par nº 3. Tal localização é pela primeira vez descrita em P. boiei, pois até então se tinha descrições apenas para o par 8, no seu braço curto. P. appendiculata do litoral de São Paulo, é a única espécie que possui esses genes também no par 3, fato que reforça a proximidade filogenética dessas espécies, antes baseada apenas em dados morfológicos. Rearranjos envolvendo elementos de transposição podem ter sido os responsáveis pela translocação dessa família multigênica nessa população paranaense, uma hipótese que merece ainda ser investigada. O sistema sexual do tipo ZZ/ZW encontrado numa população de P. boiei de São Paulo, não foi detectado no presente estudo, embora apenas machos e juvenis de sexo indeterminado foram coletados. Descrições e análises cromossômicas detalhadas permitem dar coesão às interpretações sobre a evolução cromossômica e estabelecer claramente hipóteses sobre a mesma. Portanto quantos mais dados disponíveis, os eventos cromossômicos envolvidos na evolução da família Odontophrynidae serão melhor compreendidos.